后备猪蓝耳病成功驯化一般采取三步法,包括引进后隔离期、驯化期和驯化后康复期,具体操作步骤为:
1.
后备猪隔离期(隔离舍)
此阶段目标是不引进新的PRRSV毒株,关注点是后备猪所在的隔离舍最好是离后备猪培育舍(GDU)至少150-300米以上,严格按照生物安全要求进行操作如绝不能窜舍(区域)。所有工具必须做好标记,仅限于隔离舍使用不得外借等,每天做好猪群巡视并做好临床观察记录并及时采取相应措施,在进入隔离舍1-3天采血进行PCR监测和ELLSA检测,合格后在第7天左右免疫蓝耳病弱毒疫苗(使用弱毒疫苗时,需要以毒株测序为基础,选择与场内流行毒株同源性高的疫苗)进行疫苗驯化,在隔离1-2周并使用哨兵猪确认后转群至后备猪培育舍(GDU),如猪场无隔离(驯化)舍则可在划出单独育肥舍,舍内仅饲养后备猪。
2.
后备猪驯化期(GDU)
此阶段目标继续确保不引进新的PRRSV毒株,重点是后备猪接触本场流行PRRSV,发育特异性免疫力,渡过排毒期,为发情配种做准备。一般驯化期为8-10周,但如果是复杂毒株感染场则建议90-120天或以上,在驯化期期间严格执行生物安全如所有工具必须做好标记仅限于驯化舍使用不得外借等,后备培育舍最好是离配种妊娠舍至少100米,与上次间隔3-4周左右再次加强免疫蓝耳病弱毒疫苗,加强免疫后驯化期重点就是让后备猪按照血清或其他野毒驯化的方式充分接触本场病毒,确保驯化成功,在此期间可以适当加药预防继发细菌感染。另外在进入后备猪培育舍的第28、56、84天时,每个后备栏随机采血进行ELISA检测,评估暴露成功与否。
后备猪成功驯化常用措施:
(1)血清驯化:是近年来探索出的一个较为行之有效的方案。其具体内容是先借野毒感染或疫苗接种的契机,使得猪群感染某种特定血清型 PRRSV 毒株,然后收集该阳性血清,按照一定稀释比进行稀释后接种至全群,以阻断猪群排毒,并保护未感染的猪群,从而实现对猪场中 PRRSV的控制,常见具体操作流程为:
①采集本场的PRRSV阳性猪的全血,离心分离获得血清,并进行qPCR定量;
②分离好的血清根椐定量结果稀释,配合添加双抗(2万单位青毒素/ml+1万单位链霉素/ml),稀释液需提前放置冰箱冷藏;
③用于驯化的血清最好是先检测血清中病毒滴度(一般来讲CT值在25-28之间可直接接种),椐病毒滴度来确定接种量,建议制备用于驯化的血清病毒滴度为10^2-10^4TCID50/ml,使用剂量为2ml/头,也可在使用前先做动物试验确认进行接种;
④注意使用血清需在接种前5天至接种后10天,对后备猪群加药或注射长效抗生素,如大环内酯类抗生素瑞替美(替米考星)、瑞可新(泰拉菌素)等,但如果是感染高致病性蓝耳病毒的猪场,不建议血清驯化。
(2)粪便驯化:收集1胎母猪产后24小时内的新鲜粪便或者保育阶段不健康猪的粪便(伪狂犬野毒阳性场慎用),从后备猪进场后第3周开始,返饲1-3次/周,至少喂3周左右,具体操作为将粪便投在地板上,投喂的饲料放在粪便上面,或使用泡水拌料饲喂,使用量为5-10g/头,此种方式的优点是临床反应较温和,但由于粪便中病毒含量较低有失败的可能,所以需要反复饲喂。
(3)病料驯化:选1胎母猪的胎盘(伪狂犬阳性场不适用)或临床上主要表现为乍毛、苍白、眼睑肿、呼吸频率高且有淋巴结炎的保育病猪的病料(淋巴结,血液,肺等),检测无伪狂犬野毒感染后,进行qPCR定量,按照每头后备猪饲喂1x10^4病毒粒子(可先进行动物试验安全后进行),计算好每头后备需要多少克组织病料,再进行破碎(不要使用高速的破碎机,防止瞬时高温杀死病毒)后使用生理盐水稀释,养猪知识使用方法为泡水拌料饲喂或者病料的体积/后备头数进行精准投喂,一般一次即可。
(4)呼吸接触:通过对4类断奶至保育结束的仔猪(1类,临床健康,无掉膘,无腹股沟淋巴发炎;2类,临床健康,无掉膘,腹股沟淋巴发炎;3类,乍毛、苍白、眼睑肿、呼吸频率高,无淋巴结炎;4类,有3类的临床症状,还有淋巴养猪技术网结炎)进行了研究,发现第4类仔猪的PRRSV病毒滴度明显高于其他三类,选有感染的第4类仔猪按照按20:1的比例混群2-4周,进行鼻对鼻接触可对后备猪进行驯化。
(5)疫苗驯化:即根据基础健康情况,选择相关的商品化疫苗进行驯化。该种方法的优点在于有较强的安全性、均一性和可控性,缺点在于可能和现有基础母猪群感染毒株不匹配,异源毒株交叉效果保护不佳。
3.
后备猪驯化康复期(GDU)
此阶段目标确保后备猪在进入配种妊娠舍之前,具有对本场流行的毒株具备坚强的特异性免疫力,在进入基础生产猪群前可随机采集每栏的口腔液进行PCR监测,确保入群前不排毒。
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